PDZ-RhoGEF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403444-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDZ-RhoGEFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDZ-RhoGEF (h) e o Plasmídeo Double Nickase PDZ-RhoGEF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARHGEF11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDZ-RhoGEF Anticorpo (D-9): sc-166740
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDZ-RhoGEF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403444-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDZ-RhoGEF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403444-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARHGEF11 codifica a PDZ-RhoGEF, um fator de troca de nucleotídeos de guanina específico para RhoA que conecta a sinalização de GPCRs acoplados a Gα12/13 ativados à ativação de GTPases Rho e à contratilidade actomiosínica a jusante. Ao regular a remodelação do citoesqueleto, a formação de fibras de estresse, a dinâmica de adesões focais e a polaridade celular, a PDZ-RhoGEF influencia processos como migração, adesão e a função de barreira epitelial. O arcabouço mediado por domínio PDZ e o crosstalk de sinalização integram sinais provenientes de receptores e de complexos juncionais para modular a saída da via Rho/ROCK. A desregulação da sinalização de RhoA e alterações na rede associada a ARHGEF11 têm sido implicadas em fenótipos patológicos de motilidade e invasão celular e em mudanças mais amplas de sinalização relevantes para doenças em contextos de câncer e inflamação.
PDZ-RhoGEF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARHGEF11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARHGEF11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARHGEF11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARHGEF11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.