PCGF3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405260

개요

PCGF3(Polycomb group ring finger 3)는 비정형(non-canonical) 폴리콤 억제 복합체 1(PRC1)의 핵심 구성 요소로, RING1A/RING1B와 함께 E3 유비퀴틴 리가아제로 작용하여 히스톤 H2A의 단일 유비퀴틴화(H2AK119ub)를 촉매합니다. 이러한 활성을 통해 PCGF3는 폴리콤 매개 전사 억제, 후성유전적 기억, 그리고 염색질 응축에 기여하며, 발달 과정의 유전자 발현 프로그램과 세포 운명 결정이 조율되도록 돕습니다. PCGF3를 포함하는 PRC1 복합체는 Polycomb/Trithorax 균형, PRC2 의존적 H3K27 메틸화와의 상호작용 등 더 광범위한 염색질 조절 네트워크와도 교차합니다. 폴리콤 신호전달 및 PRC1 소단위 조성의 이상 조절은 암을 비롯한 후성유전적 원인을 갖는 여러 질환에서 관찰되는 비정상적 유전자 침묵화와 전사 재프로그래밍과 자주 연관되며, 이에 따라 인간 세포에서 PCGF3 기능에 대한 기전 연구가 동기를 부여받고 있습니다.

PCGF3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PCGF3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PCGF3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PCGF3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PCGF3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PCGF3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PCGF3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PCGF3 기능에 중요한 PCGF3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PCGF3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PCGF3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PCGF3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PCGF3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PCGF3 HDR 플라스미드 (h) 및 PCGF3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PCGF3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PCGF3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.