PCDH17 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405740

Visão geral

PCDH17 (protocaderina-17) é uma molécula de adesão célula–célula dependente de cálcio da família das protocaderinas, implicada no estabelecimento e na manutenção da arquitetura tecidual, particularmente no sistema nervoso. Ao mediar interações homofílicas na membrana plasmática, a PCDH17 contribui para o crescimento de neuritos, a conectividade sináptica e processos de segregação celular que moldam a formação de circuitos. As dinâmicas de adesão associadas à PCDH17 interseccionam-se com a remodelação do citoesqueleto e com vias de sinalização que regulam migração e diferenciação, incluindo processos ligados às GTPases da família Rho. Expressão desregulada ou silenciamento epigenético de PCDH17 foi relatado em múltiplos contextos tumorais e tem sido estudado quanto a papéis em adesão alterada, comportamento invasivo e programas transcricionais específicos de linhagem.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PCDH17 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PCDH17 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PCDH17, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PCDH17 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PCDH17.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PCDH17 para a investigação da sinalização de PCDH17, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PCDH17 críticos para a função PCDH17
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PCDH17 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PCDH17 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PCDH17 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PCDH17. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PCDH17 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PCDH17 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PCDH17 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PCDH17 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.