Pax-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422120

Visão geral

Pax7 codifica Pax-7, um fator de transcrição da família paired box que define e mantém as células satélite do músculo esquelético e coordena o comprometimento com a linhagem miogênica durante o desenvolvimento e a regeneração. Pax-7 regula programas de expressão gênica que controlam a autorrenovação, a sobrevivência e a diferenciação de progenitores, e interage com redes de sinalização como Notch e Wnt, que ajustam a quiescência e a ativação de células-tronco. Em modelos murinos, a função alterada de Pax-7 perturba a dinâmica de reparo muscular e a homeostase do pool de células satélite, sustentando sua relevância para o estudo de mecanismos subjacentes à perda muscular, à regeneração prejudicada e a miopatias do desenvolvimento. Pax-7 também é utilizado como marcador e regulador em biologia neuromuscular e em estudos de destino celular, nos quais o controle transcricional da miogênese é um desfecho-chave.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pax-7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pax7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pax7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pax7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pax-7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pax7 para a investigação da sinalização de Pax-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pax7 críticos para a função Pax-7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pax7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Pax-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Pax-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pax7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Pax-7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Pax-7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pax7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pax7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.