palladin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-428317-KO-2

概要

マウスの **Palld** は、アクチン関連の足場（スキャフォールド）タンパク質である **palladin（パラディン）** をコードしており、アクチン制御因子に結合し、ストレスファイバー、フォーカルアドヒージョン、その他の接着複合体において構成要素を架橋することで、細胞骨格の組織化を協調的に制御します。palladin は、細胞形状の制御、接着の成熟、方向性のある移動を支え、Rho ファミリー GTPase からのシグナルや、アクトミオシン収縮性および細胞外マトリックス相互作用を制御する経路を統合します。palladin の発現量や局在の変化は、がんに関連する状況での異常な組織リモデリングや浸潤性表現型と関連づけられており、Palld は細胞骨格の制御破綻（ディスレギュレーション）を研究するうえで有用な結節点となります。マウス系では、Palld の改変は、発生・疾患モデルにおける運動性、メカノトランスダクション、接着依存的シグナル伝達の機構を解析するために一般的に用いられます。

palladin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるPalld遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Palld内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Palldのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、palladinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、palladinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Palld欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• palladinの機能に不可欠なPalldエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Palldゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• palladin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびpalladin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Palld遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  palladin HDRプラスミド（m）および palladin HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPalldホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPalld標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。