p53 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416469-LAC

ヒトTP53はp53をコードしており、p53は配列特異的な転写因子として、DNA損傷の検知、がん遺伝子ストレス、その他の細胞ストレスを統合し、細胞周期停止、アポトーシス、細胞老化、DNA修復を協調的に制御する。p53はCDKN1A（p21）、BAX、PUMA、GADD45などの標的遺伝子の転写制御を通じて主要なチェックポイント経路を統括し、MDM2/MDM4によるユビキチン依存的な分解（ターンオーバー）によって厳密に制御されている。さらに、PI3K–AKT、MAPK、代謝ストレス応答プログラムとも連携し、ゲノム安定性を維持して損傷細胞の増殖・伝播を抑制する。変異、コピー数異常、あるいは経路レベルでの抑制によってTP53シグナルが破綻することは腫瘍生物学の中心的特徴であり、ゲノム不安定性の機構、モデル系における治療応答表現型、ならびに細胞運命決定の研究で広く解析されている。

p53 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なTP53の発現上昇を可能にします。

p53 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、TP53転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性p53の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のTP53ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。