Date published: 2026-10-28

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P2X4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401779-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • P2X4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase P2X4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase P2X4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2RX4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:P2X4 Anticorpo (D-3): sc-518167
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    P2X4 Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-401779-NIC
    20 µg
    $410.00

    P2RX4 codifica o receptor humano P2X4, um canal de cátions não seletivo ativado por ATP que medeia um influxo rápido de Ca²⁺ e Na⁺ em resposta a nucleotídeos extracelulares. A sinalização de P2X4 contribui para a neurotransmissão purinérgica, a ativação microglial e o crosstalk inflamatório, integrando-se a vias que regulam a liberação de citocinas, a quimiotaxia e a excitabilidade celular. Em contextos do sistema imune e do sistema nervoso, a atividade de P2X4 está ligada a mecanismos subjacentes à neuroinflamação e à dor neuropática, e tem sido estudada em relação a respostas ao estresse vascular e metabólico. Como um canal iônico de membrana responsivo ao ATP associado a dano, P2X4 é um nó útil para investigar a sinalização acionada por ATP e programas transcricionais dependentes de fluxo iônico.

    P2X4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2RX4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2RX4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2RX4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2RX4 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.