Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Ox40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401326
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ox40 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Ox40, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ox40 Anticorpo (H-10): sc-376014
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ox40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401326 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TNFRSF4 codifica o OX40 (CD134), um recetor coestimulatório induzível da superfamília dos recetores de TNF, expresso principalmente em células T CD4+ e CD8+ ativadas e em subpopulações de células T reguladoras. Após a ligação ao OX40L (TNFSF4), o OX40 promove a expansão, a sobrevivência e a formação de memória das células T através do recrutamento de adaptadores TRAF e da ativação a jusante das vias de sinalização NF-κB, MAPK e PI3K/AKT. Este eixo modula a produção de citocinas, o suporte aos centros germinativos e o equilíbrio entre respostas efetoras e reguladoras. A sinalização desregulada de OX40 tem sido implicada em mecanismos de inflamação crónica e doenças autoimunes, sendo também relevante para a evasão imunitária e a disfunção de células T associada a tumores na biologia do cancro.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ox40 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TNFRSF4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TNFRSF4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TNFRSF4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ox40.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TNFRSF4 para a investigação da sinalização de Ox40, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TNFRSF4 críticos para a função Ox40
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TNFRSF4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Ox40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ox40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TNFRSF4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Ox40 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ox40 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TNFRSF4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TNFRSF4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.