OLFML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404425

Visão geral

OLFML3 (olfactomedina-like 3) codifica uma glicoproteína secretada, associada à matriz extracelular, da família das olfactomedinas, implicada em interações célula–matriz e no remodelamento tecidual. É expressa em contextos estromais e vasculares e tem sido associada à regulação de programas angiogénicos, de comportamentos do tipo fibroblasto e à modulação de microambientes inflamatórios por meio de efeitos sobre pistas de sinalização extracelular. A atividade de OLFML3 cruza-se com vias que controlam a organização da matriz extracelular, a migração celular e a comunicação endotelial–estromal, processos frequentemente alterados durante a progressão tumoral e o remodelamento fibrótico. Foi relatada expressão desregulada de OLFML3 em vários cancros e patologias associadas ao sistema vascular, o que sustenta a sua utilidade como um nó mecanístico para estudar fenótipos impulsionados pelo microambiente.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OLFML3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene OLFML3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do OLFML3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do OLFML3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OLFML3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de OLFML3 para a investigação da sinalização de OLFML3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) OLFML3 críticos para a função OLFML3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos OLFML3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OLFML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OLFML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus OLFML3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OLFML3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OLFML3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia OLFML3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo OLFML3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.