OLFML3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404425

Descripción general

OLFML3 (olfactomedina similar 3) codifica una glicoproteína secretada asociada a la matriz extracelular, perteneciente a la familia de las olfactomedinas, implicada en las interacciones célula–matriz y en la remodelación tisular. Se expresa en contextos estromales y vasculares, y se ha relacionado con la regulación de programas angiogénicos, comportamientos tipo fibroblasto y la modulación de microambientes inflamatorios mediante efectos sobre señales extracelulares. La actividad de OLFML3 se interseca con vías que gobiernan la organización de la matriz extracelular, la migración celular y el diálogo endotelio–estroma, procesos que con frecuencia se alteran durante la progresión tumoral y la remodelación fibrótica. Se ha informado de una expresión desregulada de OLFML3 en múltiples cánceres y patologías asociadas al sistema vascular, lo que respalda su utilidad como un nodo mecanístico para estudiar fenotipos impulsados por el microambiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO OLFML3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OLFML3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OLFML3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OLFML3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OLFML3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OLFML3 para la investigación de la señalización de OLFML3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de OLFML3 críticos para la función de OLFML3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OLFML3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido OLFML3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OLFML3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OLFML3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OLFML3 (h) y el plásmido HDR OLFML3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OLFML3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OLFML3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.