OGFR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407303

Visão geral

O recetor do fator de crescimento opioide (OGFR) é um recetor opioide não clássico, expresso de forma ubíqua, que se liga à [Met5]-encefalina (fator de crescimento opioide) para regular a proliferação celular e a homeostase dos tecidos. A sinalização do OGFR é mais bem caracterizada através do eixo OGF–OGFR, que modula a progressão do ciclo celular ao influenciar vias de inibidores de quinases dependentes de ciclinas e ao restringir a síntese de ADN em diversos tipos celulares. Este recetor tem sido implicado na renovação epitelial, no comportamento de células imunitárias e estromais e no controlo do crescimento em resposta ao stress, ligando a biologia do OGFR a contextos como a proliferação de células cancerígenas, a reparação de feridas e a patologia inflamatória. Como resultado, a perturbação da expressão de OGFR é frequentemente usada para dissecar redes endógenas de sinalização inibitória do crescimento e a sua interação com vias mitogénicas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OGFR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene OGFR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do OGFR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do OGFR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OGFR.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de OGFR para a investigação da sinalização de OGFR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) OGFR críticos para a função OGFR
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos OGFR para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OGFR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OGFR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus OGFR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OGFR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OGFR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia OGFR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo OGFR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.