Nup153 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-403206-KO-2

概要

NUP153は、核膜孔複合体（NPC）を構成する足場型ヌクレオポリンであるNup153をコードしており、Nup153は核バスケットに局在して核内外輸送の組織化に寄与します。Nup153は、カリオフェリン依存的な輸送を協調することで核内輸送／核外輸送に関与するほか、核周辺部でクロマチンとも相互作用し、遺伝子制御や高次のゲノム構造の形成に影響を及ぼします。さらに、核膜構造、細胞周期の進行、分裂期後の核膜孔の再構築といった役割を通じて、転写プログラムやRNAプロセシングを制御する経路にも影響します。NUP153を含む核輸送や核膜孔複合体の構成要素の異常は、複数の疾患状況で観察されるゲノム不安定性や異常なシグナル伝達と関連しており、作用機序の解明研究において重要な標的となります。

Nup153 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるNUP153遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NUP153内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NUP153のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nup153タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nup153シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NUP153欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nup153の機能に不可欠なNUP153エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NUP153ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nup153 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNup153 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NUP153遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nup153 HDRプラスミド（h）および Nup153 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNUP153ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNUP153標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。