NRSF Lentiviral Activation Particles (h): sc-418578-LAC

RE1サイレンシング転写因子（REST、別名ニューロン制限性サイレンシング因子［NRSF］）は、配列特異的な転写リプレッサーであり、RE1/NRSE配列に結合して非神経系細胞における神経関連遺伝子プログラムを抑制するとともに、神経細胞の成熟や可塑性の形成に関与します。RESTは、CoREST、HDAC、ヒストンメチルトランスフェラーゼなどの共抑制因子複合体をリクルートしてクロマチン再構築を協調的に制御し、その結果、エピジェネティック状態、シナプスシグナル伝達、ならびに活動依存的な転写ネットワークに影響を及ぼします。これらの機能を通じてRESTは、細胞運命の決定、興奮性、分化の軌跡に作用する発生シグナルやストレス応答を統合します。REST/NRSF活性の破綻は、神経発達および神経変性過程に加え、がんにおける転写ネットワークの再配線にも関与するとされており、遺伝子制御の機構研究における重要な結節点となっています。

NRSF レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なRESTの発現上昇を可能にします。

NRSF レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、REST転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性NRSFの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のRESTゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。