NOS2/iNOS慢病毒激活颗粒(h): sc-400066-LAC

人类 NOS2 基因编码诱导型一氧化氮合酶（iNOS）。iNOS 属于高产量酶，可在炎症刺激信号的作用下，将 L-精氨酸转化为一氧化氮（NO）和 L-瓜氨酸。NOS2/iNOS 的转录调控位于 NF-κB、JAK/STAT 及 MAPK 信号通路下游，整合由细胞因子与微生物模式驱动的多种通路，从而塑造先天免疫、维持氧化还原平衡并介导抗微生物效应功能。持续的 iNOS 活性会调节硝化/亚硝基化应激、蛋白质 S-亚硝基化以及线粒体功能，并进一步影响细胞凋亡、血管生成信号以及细胞外基质重塑。NOS2 表达失衡与慢性炎症及肿瘤微环境生物学相关，因此常被用作免疫学、神经炎症与癌症相关信号研究中的机制性研究靶点。

NOS2/iNOS 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 NOS2 表达。

NOS2/iNOS 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在NOS2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性NOS2/iNOS表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 NOS2 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。