Nolz-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405058

概要

ZNF503（Nolz-1）は、発生および組織のパターニング過程において、系譜特異的な遺伝子発現プログラムを調節することで細胞運命決定を制御する亜鉛フィンガー型転写因子をコードしています。Nolz-1の活性は、分化、増殖制御、モルフォゲンによって駆動されるプロセス（レチノイン酸応答性遺伝子の制御を含む）に関わる転写ネットワークに影響します。ZNF503の発現異常や調節環境の変化は、上皮―間葉系の性質の変動や状況依存的な腫瘍生物学の変化と関連付けられており、細胞アイデンティティの転写制御を研究する上で重要です。核内のDNA結合タンパク質として、Nolz-1は上流のシグナル入力と下流の遺伝子制御回路を解析するための扱いやすい結節点（ノード）となります。

Nolz-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZNF503遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZNF503内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZNF503のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nolz-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nolz-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZNF503欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nolz-1の機能に不可欠なZNF503エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZNF503ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nolz-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNolz-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZNF503遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nolz-1 HDRプラスミド（h）および Nolz-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZNF503ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZNF503標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。