NMDAε2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400654-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NMDAε2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NMDAε2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NMDAε2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIN2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NMDAε2 Anticorpo (A-8): sc-365597
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NMDAε2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400654-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NMDAε2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400654-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIN2B codifica a subunidade NMDAε2 (GluN2B) dos receptores de N-metil-D-aspartato, canais iónicos ativados por ligando que regulam o influxo de Ca²⁺ durante a neurotransmissão excitatória. Receptores que contêm NMDAε2 moldam a plasticidade sináptica, a aprendizagem e a memória ao acoplar a atividade neuronal a vias de sinalização a jusante, como a transcrição dependente de CaMKII/CREB, a sinalização MAPK/ERK e a remodelação do citoesqueleto dependente de atividade. A função de GRIN2B está intimamente ligada ao desenvolvimento de sinapses glutamatérgicas e às respostas ao stress excitotóxico, integrando sinais que influenciam a maturação das espinhas dendríticas e o refinamento dos circuitos. Variações genéticas e a desregulação de GRIN2B têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, sustentando a sua utilização em estudos mecanísticos de sinalização sináptica e da função de redes neuronais.
NMDAε2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIN2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIN2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIN2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIN2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.