neuropilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421965

概要

マウスNrp2はニューロピリン2（neuropilin-2）をコードしており、クラス3セマフォリンおよびVEGFファミリーのシグナル伝達を調節する多機能な共受容体です。これにより、軸索誘導、血管内皮およびリンパ管のパターニング、ならびに免疫細胞のトラフィッキングを制御します。ニューロピリン2は、指向性細胞移動、細胞骨格の再編成、受容体型チロシンキナーゼシグナルなどの過程に関与し、血管新生およびリンパ管新生に関連する経路に影響を与えます。多様な組織環境において、Nrp2活性の変化は、神経発生期の配線、血管透過性、炎症細胞のリクルートにおける変化と関連しています。これらの機能により、Nrp2はマウスモデルにおいて、微小環境依存的なシグナル伝達や細胞間コミュニケーションを検証するための標的（ノード）として広く用いられています。

neuropilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNrp2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nrp2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nrp2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、neuropilin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、neuropilin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nrp2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• neuropilin-2の機能に不可欠なNrp2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nrp2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• neuropilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびneuropilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nrp2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  neuropilin-2 HDRプラスミド（m）および neuropilin-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNrp2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNrp2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。