neuropilin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400428-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- neuropilin-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase neuropilin-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase neuropilin-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NRP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:neuropilin-1 Anticorpo (A-12): sc-5307
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
neuropilin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400428-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
neuropilin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400428-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NRP1 codifica a neuropilina-1, um correceptor transmembranar multifuncional que modula a sinalização de semaforinas de classe 3 e de múltiplos fatores de crescimento, incluindo ligantes da família VEGF, para regular a orientação axonal, a angiogênese e a migração de células endoteliais. A neuropilina-1 participa de vias que controlam a dinâmica do citoesqueleto, a adesão celular e o padrão de vascularização, com efeitos dependentes do contexto no desenvolvimento neuronal e no tráfego de células imunes. A expressão ou a sinalização desregulada de NRP1 tem sido associada a alterações no remodelamento vascular, a microambientes inflamatórios e a programas angiogênicos associados a tumores, tornando-a um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos da sinalização do microambiente. In vitro, a perturbação de NRP1 é comumente avaliada em modelos celulares endoteliais, neuronais e de câncer para mapear complexos de receptores dependentes de ligante e o redirecionamento de vias a jusante.
neuropilin-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NRP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NRP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NRP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NRP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.