Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419233

概要

Neurog2 は、マウス胚発生期における神経系細胞系列へのコミットメントを制御するマスター因子である、塩基性ヘリックス–ループ–ヘリックス（bHLH）型転写因子 Neurogenin 2 をコードします。Neurogenin 2 は、神経前駆（proneural）遺伝子の発現プログラムを駆動し、Notch シグナル伝達や下流の bHLH 因子と接続する転写ネットワークを介して、細胞周期からの離脱、神経細胞への分化、移動を協調的に制御します。発生過程の中枢および末梢神経系における複数の神経細胞サブタイプの規定や、神経新生のタイミング制御に不可欠です。NEUROG2 依存性プログラムの異常は、神経発達に関わる表現型や神経分化状態の変化と関連づけられており、発達性脳疾患のモデル化において重要な要素と考えられています。

Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNeurog2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Neurog2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Neurog2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Neurogenin 2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Neurogenin 2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Neurog2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Neurogenin 2の機能に不可欠なNeurog2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Neurog2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNeurogenin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Neurog2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Neurogenin 2 HDRプラスミド（m）および Neurogenin 2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNeurog2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNeurog2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。