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NCoA-3双切口酶质粒(h) | sc-401496-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NCoA-3双切口酶质粒(h2) | sc-401496-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NCOA3 编码核受体共激活因子3(NCoA-3/SRC-3)。它是一种转录共激活因子,可将配体激活的核受体及其他转录因子与染色质重塑以及由 RNA 聚合酶 II 驱动的转录过程连接起来。NCoA-3 通过招募组蛋白乙酰转移酶及其他共调控因子,整合类固醇激素受体与生长因子应答通路的信号,从而调控控制增殖、分化、代谢和应激反应的基因程序。通过这些作用,NCOA3 会影响细胞周期进程,并调控与内分泌信号及致癌性转录重编程相关的转录网络。NCOA3 活性异常与激素受体信号失衡及多种癌相关表型有关,因此是研究转录调控机制的一个有价值靶点。
NCoA-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NCOA3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NCOA3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NCOA3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NCOA3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。