Na⁺ CP type Iα CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422818

개요

Scn1a는 전압개폐성 나트륨 채널의 α 소단위인 Na+ CP type Iα를 암호화하며, 이는 뉴런에서 활동전위의 시작과 전파를 결정하는 핵심 요인이다. 축삭기시부(axon initial segment)와 랑비에 결절(nodes of Ranvier)에서 빠른 내향성 Na+ 전류를 조절함으로써 뉴런의 발화 역치, 스파이크 타이밍, 그리고 네트워크 동기화를 형성한다. Scn1a의 기능은 흥분성–억제성 균형, 활동 의존적 신호전달, 그리고 시냅스 전달과 회로 안정성에 영향을 미치는 이온 항상성 경로와도 맞물린다. SCN1A의 유전적·기능적 교란은 발작 취약성과 신경발달 관련 표현형과 강하게 연관되어 있어, 마우스 모델에서 기전 연구를 위한 주요 표적 유전자 좌위로 여겨진다.

Na+ CP type Iα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Scn1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Scn1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Scn1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Na+ CP type Iα 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Na+ CP type Iα 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Scn1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Na+ CP type Iα 기능에 중요한 Scn1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Scn1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Na+ CP type Iα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Na+ CP type Iα CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Scn1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Na+ CP type Iα HDR 플라스미드 (m) 및 Na+ CP type Iα HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Scn1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Scn1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.