NALP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406528

概要

NLRP10（NALP10）は、自然免疫シグナル伝達と炎症の恒常性の調節に関与するとされるNOD様受容体（NLR）ファミリーの一員です。典型的なインフラマソーム形成型NLRとは異なり、NLRP10は状況依存的に、NF-κB依存性転写の調節、サイトカイン応答、ならびにインフラマソーム関連アウトプットの制御に関与することが示唆されています。さらに、樹状細胞の遊走やT細胞プライミングへの影響など、抗原提示細胞の機能にも寄与し、免疫の活性化と寛容を形作る経路の中にNLRP10を位置づけています。NLRP10活性の変化は免疫調節異常や炎症性表現型と関連づけられており、免疫学および宿主応答モデルにおける機序解明研究の標的として有用であることを裏づけています。

NALP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNLRP10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NLRP10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NLRP10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NALP10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NALP10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NLRP10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NALP10の機能に不可欠なNLRP10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NLRP10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NALP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNALP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NLRP10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NALP10 HDRプラスミド（h）および NALP10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNLRP10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNLRP10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。