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N-cadherin双切口酶质粒(m) | sc-419593-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N-cadherin双切口酶质粒(m2) | sc-419593-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Cdh2 基因编码 N-钙黏蛋白(N-cadherin),这是一种钙依赖性的黏附受体,可介导同源性细胞–细胞连接,并通过连环蛋白(catenin)复合体与肌动蛋白细胞骨架相连接。N-钙黏蛋白协调由细胞接触触发的信号传导,影响类似上皮向间质转化(EMT)的程序、集体迁移、神经突起生长和突触形成,并与 Wnt/β-catenin、Rho GTPase 以及 Hippo/YAP/TAZ 等调控细胞极性与机械信号转导的通路发生交互。在发育与组织重塑过程中,Cdh2 对形态发生、心脏与神经系统的模式形成以及黏着连接(adherens junction)完整性的维持至关重要。N-钙黏蛋白表达量或定位的失调常被用作纤维化、神经发育障碍和癌细胞侵袭等模型中黏附状态改变的标志物,从而支持对黏附依赖性表型机制的研究。
N-cadherin 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cdh2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cdh2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cdh2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cdh2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。