Myosin Va CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402108

개요

MYO5A는 피질(actin) 네트워크를 따라 막 결합 소기관과 단백질 복합체를 장거리로 수송하는, 액틴 기반 모터 단백질인 미오신 Va를 암호화합니다. 미오신 Va는 Rab GTPase 및 어댑터 단백질과 협력하여 소포 수송, 엔도사이토시스 재활용, 분비 과립의 동역학, 그리고 뉴런·멜라노사이트·면역세포에서의 화물의 극성(편재) 전달을 조절합니다. 이러한 과정은 시냅스 기능, 멜라노좀 분포, 세포 극성 형성에 기여하며, 기능이 교란될 경우 MYO5A 활성 이상이 신경학적 및 색소 관련 표현형과 연결됨을 시사합니다. 인간 세포 모델에서는 미오신 Va 의존적 수송의 변화가 질환 관련 세포 기능 장애와 연관된 구획화된 신호전달과 세포골격 조직에도 영향을 줄 수 있습니다.

Myosin Va CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MYO5A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MYO5A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MYO5A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Myosin Va 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Myosin Va 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MYO5A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Myosin Va 기능에 중요한 MYO5A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MYO5A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Myosin Va CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Myosin Va CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MYO5A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Myosin Va HDR 플라스미드 (h) 및 Myosin Va HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MYO5A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MYO5A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.