MYH6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400351

概要

MYH6は、横紋筋においてアクチン依存的な収縮力の発生を担うサルコメアの主要なモータータンパク質である心筋ミオシンIIのα重鎖をコードします。ATPase活性により駆動されるクロスブリッジサイクルを介して、MYH6は筋原線維の構築、カルシウム感受性の収縮性、ならびに心筋の発生に寄与し、サルコメアの組み立てやメカノトランスダクションを制御する経路と統合的に機能します。MYH6の発現変化や配列変異は、遺伝性心筋症や先天性心疾患の表現型と関連しており、心筋機能におけるその中心的役割を反映しています。組織特異的に発現が高い収縮関連遺伝子として、MYH6は細胞・遺伝学的モデル系において、心筋細胞の成熟、ストレス応答、構造的リモデリングを解析するために広く用いられています。

MYH6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMYH6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MYH6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MYH6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MYH6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MYH6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MYH6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MYH6の機能に不可欠なMYH6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MYH6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MYH6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMYH6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MYH6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MYH6 HDRプラスミド（h）および MYH6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMYH6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMYH6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。