MYEOV2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409378

概要

COPS9は、COP9シグナロソームの中核構成要素をコードしている。COP9シグナロソームは複数タンパク質からなる複合体で、カリュリンのネディル化状態を制御することにより、カリュリンRING型ユビキチンリガーゼ（CRL）を調節する。この作用を通じてCOPS9は、ユビキチン依存的なプロテオスタシス、細胞周期の進行、DNA損傷応答、ならびに増殖と分化を制御するシグナル伝達経路に影響を及ぼす。COP9シグナロソーム機能が破綻すると、主要な制御タンパク質の分解回転が変化し、ストレス応答や発生・分化プログラムが再編され得る。これらの過程の異常な制御は、がん化に関連する表現型や、ユビキチン経路の不均衡に起因するその他の疾患と関連づけられている。

MYEOV2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOPS9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COPS9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COPS9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MYEOV2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MYEOV2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COPS9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MYEOV2の機能に不可欠なCOPS9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COPS9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MYEOV2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMYEOV2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COPS9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MYEOV2 HDRプラスミド（h）および MYEOV2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOPS9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOPS9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。