MYEOV2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-409378

Übersicht

COPS9 kodiert eine zentrale Komponente des COP9-Signalosoms, eines Multiproteinkomplexes, der Cullin-RING-Ubiquitin-Ligasen reguliert, indem er den Neddylierungsstatus von Cullinen steuert. Über diese Aktivität beeinflusst COPS9 die ubiquitinabhängige Proteostase, den Fortschritt des Zellzyklus, DNA-Schadensantworten sowie Signaltransduktionswege, die Proliferation und Differenzierung steuern. Eine Störung der Funktion des COP9-Signalosoms kann den Abbau wichtiger regulatorischer Proteine verändern und Stress- sowie Entwicklungsprogramme neu ausrichten. Eine fehlregulierte Kontrolle dieser Prozesse wurde mit onkogenen Phänotypen und anderen Erkrankungen in Verbindung gebracht, die mit einem Ungleichgewicht im Ubiquitin-System zusammenhängen.

Das MYEOV2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des COPS9-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des COPS9-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von COPS9 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MYEOV2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von COPS9-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MYEOV2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf COPS9-Exone abzielen, die für die MYEOV2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere COPS9-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MYEOV2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MYEOV2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des COPS9-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MYEOV2 HDR-Plasmid (h) und MYEOV2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von COPS9-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten COPS9-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.