musculin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403242-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- musculinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase musculin (h) e o Plasmídeo Double Nickase musculin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MSC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:musculin Anticorpo (4D7): sc-293482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
musculin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
musculin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene MSC humano codifica a musculina, um fator de transcrição do tipo hélice-alça-hélice básica (bHLH) que regula programas de expressão gênica responsáveis pela especificação de linhagens e pela diferenciação celular. A musculina modula a transcrição por meio da ligação ao DNA dependente de E-box e da interação com outros fatores bHLH, conectando-a a vias de desenvolvimento e de destino celular que influenciam estados de proliferação e maturação. Alterações na expressão de MSC têm sido relatadas em diferentes contextos envolvendo diferenciação desregulada e reprogramação transcricional, incluindo fenótipos associados ao câncer e mudanças de estado em células imunes ou estromais. Essas propriedades tornam a musculina um alvo útil para estudos mecanísticos de controle transcricional, identidade celular e intercomunicação entre vias em modelos celulares humanos.
musculin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MSC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MSC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MSC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MSC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.