MuRF1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400797

개요

TRIM63는 근육 특이적 E3 유비퀴틴 리가아제인 MuRF1을 암호화하며, MuRF1은 근절(sarcomere) 구조에 국소화되는 RING-finger 단백질로서 수축 단백질과 조절 단백질의 유비퀴틴 의존적 분해(턴오버)를 촉진합니다. MuRF1은 유비퀴틴–프로테아좀 시스템 내에서 기능하고, 영양 결핍, 신경지배 소실(denervation), 염증성 자극 상황에서 근원섬유를 재구성하기 위해 자가포식 및 스트레스 반응 신호와 협력합니다. 또한 MuRF1의 전사 및 번역 후 조절은 FOXO 매개 atrogene 프로그램, 인슐린/IGF-1–AKT 신호, NF-κB 관련 이화작용 경로와 교차합니다. TRIM63 활성이 비정상적으로 조절되면 골격근 위축 표현형 및 근육 항상성 변화와 연관되며, 단백질 항상성(proteostasis), 대사, 근육 소모 기전 연구에서 중요한 표적 노드로 간주됩니다.

MuRF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRIM63 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRIM63 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRIM63의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MuRF1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MuRF1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRIM63 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MuRF1 기능에 중요한 TRIM63 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRIM63 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MuRF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MuRF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRIM63 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MuRF1 HDR 플라스미드 (h) 및 MuRF1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRIM63 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRIM63 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.