Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Mucin 1/MUC1 Double Nickase Plasmid (h): sc-416876-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Mucin 1/MUC1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Mucin 1/MUC1 Double-Nickase-Plasmid (h) und Mucin 1/MUC1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MUC1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Mucin 1/MUC1: sc-7313
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Mucin 1/MUC1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-416876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mucin 1/MUC1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-416876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC1 kodiert für Mucin 1, ein stark O-glykosyliertes Typ‑I-Transmembranmucin, das auf der apikalen Oberfläche vieler Epithelgewebe exprimiert wird und dort zur Barrierefunktion, Hydratation und zum Schutz vor Umweltstress beiträgt. Über seinen zytoplasmatischen Schwanz bindet MUC1 an Signalnetzwerke, die Zellpolarität, Adhäsion und transkriptionelle Antworten regulieren, und greift in Signalwege wie Rezeptor-Tyrosinkinasen und nachgeschaltete MAPK-/PI3K-assoziierte Prozesse ein. Veränderungen der MUC1-Expression, -Lokalisation oder -Glykoformen werden häufig mit einer gestörten epithelialen Organisation und veränderten Immuninteraktionen in entzündlichen und neoplastischen Kontexten in Verbindung gebracht. Daher wird MUC1 breit als Modulator der epithelialen Homöostase, der Tumorzellbiologie und mucinabhängiger Signalgebung im Mikromilieu untersucht.
Mucin 1/MUC1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MUC1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MUC1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MUC1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MUC1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.