MRS2L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410061

Descripción general

El gen humano **MRS2** codifica **MRS2L**, un canal mitocondrial de **Mg2+** localizado en la membrana interna, esencial para mantener la homeostasis del magnesio en la matriz, sostener la fosforilación oxidativa y amortiguar el estrés bioenergético. Al regular actividades dependientes de Mg2+, como el manejo de ATP y la función de enzimas mitocondriales, MRS2L influye en el potencial de membrana mitocondrial, el acoplamiento con el calcio y el equilibrio de especies reactivas de oxígeno. La alteración del transporte iónico mitocondrial y de la disponibilidad de Mg2+ se ha implicado en defectos del metabolismo mitocondrial y de las respuestas al estrés, que se estudian con frecuencia en la neurodegeneración, los trastornos cardiometabólicos y la adaptación de células cancerosas. Por ello, MRS2L constituye un punto de interés útil para investigar la señalización mitocondrial, la plasticidad metabólica y las vías de control de calidad de los orgánulos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MRS2L (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MRS2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MRS2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MRS2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MRS2L.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MRS2 para la investigación de la señalización de MRS2L, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MRS2 críticos para la función de MRS2L
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MRS2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MRS2L CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MRS2L CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MRS2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MRS2L (h) y el plásmido HDR MRS2L (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MRS2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MRS2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.