Plásmido Doble Nickase (m) mitochondrial ferritin: sc-426664-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)mitochondrial ferritin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa mitochondrial ferritin (m) y el plásmido de doble nickasa mitochondrial ferritin (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ftmt. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) mitochondrial ferritin | sc-426664-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse **Ftmt** codifica la **ferritina mitocondrial**, una proteína secuestradora de hierro localizada en la **matriz mitocondrial** que amortigua el hierro redox‑activo y ayuda a limitar la generación de **especies reactivas de oxígeno**. Al almacenar hierro en una cubierta tipo ferritina, **Ftmt** contribuye a la homeostasis del hierro mitocondrial, sostiene la integridad de la cadena respiratoria e influye en vías vinculadas a las respuestas al estrés oxidativo y al control de calidad mitocondrial. Las alteraciones en el manejo del hierro mitocondrial se han relacionado con neurodegeneración, fenotipos asociados a la anemia y estrés metabólico, lo que convierte a **Ftmt** en un locus útil para estudiar la susceptibilidad a la **ferroptosis** y la disfunción mitocondrial en células de mamífero. La expresión de **Ftmt** también se utiliza como lectura en modelos de sobrecarga de hierro y de cambios en el tráfico celular del hierro asociados a la inflamación.
mitochondrial ferritin El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ftmt en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ftmt. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ftmt. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ftmt alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.