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MICA慢病毒激活颗粒(h) | sc-418864-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 MICA 基因编码 MHC I 类多肽相关序列 A(MICA),这是一种可由应激诱导并展示于细胞表面的配体,可与 NK 细胞及部分 CD8⁺ T 细胞上的活化受体 NKG2D 结合。其表达受 DNA 损伤与细胞应激通路调控,并与免疫监视程序相衔接,参与调控细胞毒性识别与细胞因子信号传导。MICA 也会发生蛋白水解性剪切脱落(shedding)以及等位基因变异,这些过程可调节 NKG2D 信号强度并促进免疫逃逸。MICA 表达与脱落的失衡与肿瘤免疫生物学、病毒感染应答及炎症性疾病相关,因此是研究先天与适应性免疫串扰的一个重要节点。
MICA 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MICA 表达。
MICA 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在MICA转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性MICA表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 MICA 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。