mGluR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406953

概要

GRM7 は代謝型グルタミン酸受容体7（mGluR-7）をコードしており、主に Gi/o タンパク質に共役してアデニル酸シクラーゼ活性を低下させ、イオンチャネル機能を調節するクラスCのGPCRです。mGluR-7 はシナプス前終末のアクティブゾーンに豊富に局在し、オートレセプター／ヘテロレセプターとして神経伝達物質放出を抑制するとともに、cAMP/PKA シグナルおよび下流の MAPK/ERK 経路を介してシナプス伝達と可塑性を微調整します。興奮性―抑制性バランスや回路の興奮性の制御に関わることから、GRM7 は神経発達および精神神経系の表現型、ならびに発作感受性やストレス関連行動の機序の文脈でしばしば研究されています。ヒト mGluR-7 シグナルはシナプス構築や活動依存的リモデリングにも関連しており、神経モデルにおける経路レベルの解析に有用なノードとなります。

mGluR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGRM7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GRM7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GRM7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、mGluR-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、mGluR-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GRM7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• mGluR-7の機能に不可欠なGRM7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GRM7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• mGluR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびmGluR-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GRM7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  mGluR-7 HDRプラスミド（h）および mGluR-7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGRM7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGRM7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。