MDC CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422840

개요

Ccl22는 대식세포 유래 케모카인(macrophage-derived chemokine, MDC)을 암호화하며, MDC는 면역세포의 방향성 이동을 촉진하는 CCR4의 리간드입니다. 특히 Th2로 편향된 CD4+ T 세포, 조절 T 세포(Treg), 그리고 기타 CCR4를 발현하는 백혈구의 이동을 유도합니다. MDC는 염증성 자극에 반응해 대식세포, 수지상세포 및 기타 기질/면역 세포 집단에서 생성되며, 백혈구 이동, 항원 유도성 반응, 조직 내 면역세포 구성에 영향을 미칩니다. PI3K–AKT 및 MAPK 같은 GPCR 의존 경로를 활성화하고 세포골격 역학을 조절하는 케모카인 수용체 신호전달을 통해 Ccl22는 면역 항상성과 국소 염증 미세환경 형성에 기여합니다. Ccl22/MDC 신호의 조절 이상은 마우스 모델에서 알레르기성 염증, 자가면역, 종양–면역 상호작용과 관련된 T 세포 유입(모집) 양상의 변화와 연관되어 왔습니다.

MDC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccl22 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccl22 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccl22의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MDC 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MDC 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccl22 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MDC 기능에 중요한 Ccl22 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccl22 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MDC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MDC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccl22 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MDC HDR 플라스미드 (m) 및 MDC HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccl22 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccl22 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.