MCT9 Lentiviral Activation Particles (h): sc-409073-LAC

SLC16A9 kodiert den Monocarboxylat-Transporter 9 (MCT9), einen membranständigen Multipass-Transporter aus der Solute-Carrier-16-Familie, der zum transmembranen Transport kleiner organischer Anionen und verwandter Metabolite beiträgt. Indem MCT9 den Metabolitenfluss in Zellen und Epithelien mitprägt, ist er für die metabolische Homöostase sowie für Transportprozesse relevant, die die Nährstoffverwertung und die Disposition von Xenobiotika beeinflussen. Genetische und funktionelle Studien haben die Aktivität von SLC16A9 mit Unterschieden in den zirkulierenden Uratspiegeln und weiteren metabolischen Merkmalen in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz in mechanistischer Forschung zur renalen und systemischen Stoffwechselregulation stützt. Die Untersuchung von Expression und Funktion von MCT9 hilft zu klären, wie Transporternetzwerke die Verfügbarkeit von Metaboliten, Signalwege und Stressantworten in verschiedenen Geweben modulieren.

MCT9 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SLC16A9-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

MCT9 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SLC16A9-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen MCT9-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SLC16A9-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.