MBOAT1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406397

Übersicht

MBOAT1 (membrane bound O-acyltransferase domain containing 1) kodiert eine mit dem endoplasmatischen Retikulum assoziierte Acyltransferase, die an der Lipid-Remodellierung beteiligt ist, indem sie Fettsäure-Acylgruppen auf hydroxylierte Substrate überträgt und so die Zusammensetzung der Membranlipide sowie die zelluläre Lipidhomöostase beeinflusst. Durch die Modulation des Gleichgewichts bioaktiver Lipide und der Membraneigenschaften kann MBOAT1 Signalprozesse beeinflussen, die mit der Stoffwechselregulation, der Organellenfunktion und zellulären Stressantworten verknüpft sind. Eine veränderte Aktivität membrangebundener Acyltransferasen wurde in Kontexten wie Dyslipidämie, inflammatorischer Signalgebung und Tumorbiologie untersucht, in denen Verschiebungen der Lipidzusammensetzung Proliferations- und Überlebenswege umformen können. Daher ist MBOAT1 ein nützliches Ziel, um lipidgetriebene Mechanismen zu untersuchen, die Membran-Remodellierung mit nachgeschalteten zellulären Phänotypen koppeln.

Das MBOAT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MBOAT1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MBOAT1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MBOAT1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MBOAT1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MBOAT1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MBOAT1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MBOAT1-Exone abzielen, die für die MBOAT1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MBOAT1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MBOAT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MBOAT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MBOAT1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MBOAT1 HDR-Plasmid (h) und MBOAT1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MBOAT1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MBOAT1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.