MBOAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406397

概要

MBOAT1（membrane bound O-acyltransferase domain containing 1）は、小胞体に局在するアシルトランスフェラーゼをコードしており、水酸基を有する基質に脂肪酸アシル基を転移することで脂質リモデリングに関与し、膜脂質組成および細胞の脂質恒常性に影響を与えます。生理活性脂質のバランスや膜の物性を調節することにより、MBOAT1は代謝制御、オルガネラ機能、細胞ストレス応答に関連するシグナル伝達プロセスに影響し得ます。膜結合型アシルトランスフェラーゼの活性変化は、脂質異常症、炎症性シグナル、腫瘍生物学などの文脈で検討されており、脂質組成の変化が増殖・生存経路を再構築し得ることが示唆されています。そのため、MBOAT1は、膜リモデリングを下流の細胞表現型へと結び付ける脂質駆動メカニズムを解明するうえで有用な標的です。

MBOAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMBOAT1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MBOAT1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MBOAT1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MBOAT1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MBOAT1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MBOAT1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MBOAT1の機能に不可欠なMBOAT1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MBOAT1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MBOAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMBOAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MBOAT1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MBOAT1 HDRプラスミド（h）および MBOAT1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMBOAT1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMBOAT1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。