Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MAT IIα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402566-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAT IIαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MAT IIα (h) e o Plasmídeo Double Nickase MAT IIα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MAT2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAT II Anticorpo (F-12): sc-398917
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAT IIα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402566-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAT IIα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402566-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAT2A codifica a subunidade catalítica α da metionina adenosiltransferase II (MAT IIα), que sintetiza S-adenosil-L-metionina (SAM), o principal doador de grupos metil para reações de metilação de DNA, RNA e histonas. Ao controlar a disponibilidade intracelular de SAM, a MAT IIα conecta o ciclo da metionina e o metabolismo de um carbono à regulação epigenética, à biossíntese de poliaminas e ao equilíbrio redox por meio da via de transsulfuração. A atividade de MAT2A está intimamente associada a programas proliferativos e a estados de detecção de nutrientes, o que a torna relevante para estudos de adaptação metabólica e de regulação gênica dependente de cromatina. Alterações na expressão de MAT2A ou na dependência dessa via foram relatadas em diversos contextos de doença, incluindo metabolismo do câncer e fisiopatologia relacionada ao fígado, sustentando seu uso como uma ferramenta molecular para investigar fenótipos dirigidos por metilação.
MAT IIα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MAT2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MAT2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MAT2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MAT2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.