MARK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406362

概要

MARK3（microtubule affinity-regulating kinase 3）は、PAR-1/MARKファミリーに属するセリン／スレオニンキナーゼで、tauを含む微小管関連タンパク質をリン酸化し、微小管ダイナミクスや細胞極性を調節します。極性制御のシグナルの下流で機能し、細胞骨格リモデリング、小胞輸送、細胞周期進行を制御する経路とも交差します。神経形態形成や軸索—樹状突起の規定における役割を通じて、MARK3活性の破綻は異常なtauリン酸化や神経変性に関連する過程と結び付けられています。MARK3はまた、上皮細胞の極性喪失や遊走能の変化といった文脈でも研究されており、微小管の不安定化が疾患関連の細胞表現型に寄与します。

MARK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMARK3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MARK3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MARK3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MARK3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MARK3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MARK3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MARK3の機能に不可欠なMARK3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MARK3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MARK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMARK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MARK3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MARK3 HDRプラスミド（h）および MARK3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMARK3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMARK3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。