MALT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-433761

概要

Malt1（MALT1）はパラカスパーゼであり足場（スキャフォールド）タンパク質でもあり、リンパ球における抗原受容体依存的シグナル伝達に必須です。CARD11–BCL10–MALT1（CBM）複合体の一員として機能し、受容体の刺激をNF-κBおよびMAPK経路の活性化へと結び付けます。MALT1は、複数のシグナル制御因子をプロテアーゼ依存的に切断する作用と、プロテアーゼ非依存的な足場機能の両方を通じて、免疫細胞の活性化・増殖・サイトカイン産生を制御する転写プログラムの調整に寄与します。マウスモデルでは、Malt1活性の変化が免疫恒常性を乱し、炎症、リンパ球分化、免疫介在性病態の基盤機構を調べるために広く用いられています。さらに、その経路上の結節点としての性質から、造血系および免疫細胞の文脈におけるシグナルネットワーク再配線の解析にも重要な標的となります。

MALT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMalt1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Malt1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Malt1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MALT1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MALT1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Malt1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MALT1の機能に不可欠なMalt1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Malt1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MALT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMALT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Malt1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MALT1 HDRプラスミド（m）および MALT1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMalt1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMalt1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。