MAGE-D4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418394-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAGE-D4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MAGE-D4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MAGE-D4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MAGED4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAGE-D4/MAGE-D4B Anticorpo (E-7): sc-393203
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAGE-D4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418394-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAGE-D4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418394-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAGED4 codifica o membro D da família de antígenos do melanoma 4 (MAGE-D4), uma proteína associada a câncer/testículo implicada na regulação de programas de crescimento celular e de sinalização adaptativa ao estresse. As proteínas MAGE podem atuar como moduladoras da degradação proteica dependente de ubiquitina por meio de interações com ligases de ubiquitina E3, influenciando assim a estabilidade de proteínas, o controle transcricional e a progressão do ciclo celular. A expressão aberrante de MAGED4 foi relatada em diversos tipos de tumor e é frequentemente estudada no contexto de remodelação de vias oncogênicas, proliferação e aptidão das células tumorais. Como membro de uma família de antígenos humanos, o MAGE-D4 também é relevante para investigações de expressão gênica associada a tumores e para o perfilamento molecular relacionado ao sistema imune em sistemas modelo.
MAGE-D4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MAGED4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MAGED4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MAGED4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MAGED4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.