Date published: 2026-7-11

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MAGE-A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401056-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • MAGE-A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase MAGE-A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MAGE-A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MAGEA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAGE-A1 Anticorpo (MA454): sc-20033
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    MAGE-A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-401056-NIC
    20 µg
    $410.00

    MAGE-A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-401056-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    MAGEA1 codifica a MAGE-A1, um antígeno câncer-testículo normalmente restrito a tecidos da linhagem germinativa com privilégio imunológico, mas expresso de forma aberrante em múltiplos tipos de tumor, o que o torna um marcador amplamente utilizado de programas transcricionais associados a tumores. A MAGE-A1 pode interagir com ligases E3 de ubiquitina e com a maquinaria relacionada de controle de qualidade proteica, ligando-a à regulação da estabilidade de proteínas, a respostas ao estresse e ao controle dependente do contexto da sinalização celular. Sua expressão é influenciada por mecanismos epigenéticos como metilação do DNA e remodelamento da cromatina, conectando MAGEA1 a vias que governam repressão e desrepressão transcricional. Em contextos de pesquisa, MAGEA1 é estudado por seus papéis na apresentação de antígenos e no reconhecimento imune, na plasticidade de células tumorais e em como a desregulação epigenética permite a expressão gênica inadequada à linhagem celular.

    MAGE-A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MAGEA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MAGEA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MAGEA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MAGEA1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.