LTBP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402289
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LTBP-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LTBP-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LTBP-1 Anticorpo (H-1): sc-271140
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LTBP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402289 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
LTBP1 codifica a proteína 1 de ligação ao fator de crescimento transformador beta latente (LTBP-1), uma glicoproteína da matriz extracelular que se liga ao complexo latente de TGF-β e regula seu sequestro, ativação e apresentação espacial às células. Ao controlar a biodisponibilidade do TGF-β, a LTBP-1 influencia a sinalização dependente de SMAD e programas a jusante envolvidos em remodelamento da matriz, transição epitelial–mesenquimal, adesão celular e homeostase tecidual. A função de LTBP1 está intimamente ligada à organização das microfibrilas de fibrilina e à ativação do TGF-β regulada por mecanismos mecânicos, conectando a arquitetura da matriz extracelular à sinalização por citocinas. A atividade desregulada do eixo LTBP1/TGF-β está implicada no remodelamento associado à fibrose, na sinalização estromal associada ao câncer e na patobiologia vascular/do tecido conjuntivo, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados pelo microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LTBP-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LTBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LTBP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LTBP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LTBP-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LTBP1 para a investigação da sinalização de LTBP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LTBP1 críticos para a função LTBP-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LTBP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LTBP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LTBP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LTBP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LTBP-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LTBP-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LTBP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LTBP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.