LRRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421471

概要

Leucine rich repeat neuronal 1（LRRN1；Lrrn1）は、神経組織に豊富に発現する一回膜貫通型タンパク質をコードしており、細胞間相互作用や神経突起に関連する過程への関与が示唆されています。LRRN1は細胞外側のロイシンリッチリピート（LRR）ドメインを介して、接着依存的なシグナル伝達、神経分化、発生過程における組織パターニングに影響すると考えられており、膜構造の制御やシナプス形成／軸索ガイダンスのプログラムを司る経路との関連も報告されています。LRRN1の発現変動は複数のがん関連トランスクリプトームデータセットで報告されており、臨床的有用性を示唆するものではないものの、増殖・遊走・分化状態への寄与を検討する意義を支持します。マウス系では、Lrrn1の機能撹乱は、LRRN1が神経細胞およびその他のLRRN1発現細胞種において発生表現型やシグナル出力をどのように形成するかを解析するための扱いやすいモデルとなります。

LRRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLrrn1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lrrn1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lrrn1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LRRN1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LRRN1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lrrn1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LRRN1の機能に不可欠なLrrn1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lrrn1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LRRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびLRRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lrrn1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LRRN1 HDRプラスミド（m）および LRRN1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLrrn1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLrrn1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。