LRRC50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407107
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRRC50 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LRRC50, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRRC50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407107 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DNAAF1 (LRRC50) codifica uma proteína com repetições ricas em leucina, necessária para a pré-montagem citoplasmática dos braços de dineína axonemal, uma etapa-chave na biogênese de cílios móveis. Ela auxilia na maturação e no tráfego do complexo motor de dineína antes de sua incorporação ao axonema, regulando assim o batimento ciliar e a depuração mucociliar. A disfunção de DNAAF1 prejudica a formação dos braços de dineína externos e internos e compromete o fluxo de fluidos impulsionado pelos cílios. Variantes patogênicas estão associadas à discinesia ciliar primária com defeitos de lateralidade, tornando DNAAF1 um alvo relevante para o estudo de ciliopatias e de programas de desenvolvimento dependentes de cílios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LRRC50 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNAAF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNAAF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNAAF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LRRC50.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNAAF1 para a investigação da sinalização de LRRC50, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNAAF1 críticos para a função LRRC50
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNAAF1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LRRC50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LRRC50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNAAF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LRRC50 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LRRC50 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNAAF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNAAF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.