LRRC34 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428084-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRRC34O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LRRC34 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LRRC34 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lrrc34. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRRC34 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428084-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRRC34 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428084-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Lrrc34 de camundongo codifica a LRRC34, uma proteína contendo repetições ricas em leucina, implicada em redes de interação proteína–proteína que sustentam a organização e a sinalização celulares. Embora seus parceiros moleculares ainda não estejam completamente definidos, proteínas com repetições LRR comumente participam de funções de ancoragem/escaffold, influenciando a dinâmica do citoesqueleto, o tráfego de membranas e programas transcricionais associados à diferenciação. Foi relatada expressão de Lrrc34 em contextos da linhagem germinativa e do desenvolvimento inicial, sugerindo papéis potenciais na regulação do estado de células-tronco/progenitoras e no compromisso de linhagem. A desregulação de proteínas com repetições ricas em leucina é amplamente relevante para anomalias do desenvolvimento e para a reprogramação da sinalização associada ao câncer, tornando Lrrc34 um alvo útil para estudos mecanísticos nessas vias.
LRRC34 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lrrc34 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lrrc34. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lrrc34. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lrrc34 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.