LPAAT-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406544
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LPAAT-α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LPAAT-α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LPAAT-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406544 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
AGPAT1 codifica a aciltransferase alfa do ácido lisofosfatídico (LPAAT-α), uma aciltransferase associada ao retículo endoplasmático que converte ácido lisofosfatídico em ácido fosfatídico, um intermediário central na biossíntese de glicerofosfolipídios e triacilgliceróis. Ao regular os pools de ácido fosfatídico, a LPAAT-α influencia a biogênese de membranas, a formação de gotículas lipídicas e a sinalização lipídica a jusante, que impacta a dinâmica de organelas e as respostas celulares ao estresse. A perturbação da atividade de AGPAT1 pode alterar a composição de fosfolipídios e o fluxo metabólico, ligando essa enzima a vias relevantes para a homeostase lipídica e o equilíbrio energético. O metabolismo de glicerolipídios desregulado envolvendo AGPAT1 tem sido investigado no contexto de fenótipos metabólicos e do neurodesenvolvimento, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de processos celulares impulsionados por lipídios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LPAAT-α (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AGPAT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AGPAT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AGPAT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LPAAT-α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AGPAT1 para a investigação da sinalização de LPAAT-α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AGPAT1 críticos para a função LPAAT-α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AGPAT1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LPAAT-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LPAAT-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AGPAT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LPAAT-α Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LPAAT-α (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AGPAT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AGPAT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.