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LMX1B慢病毒激活颗粒(h) | sc-402945-LAC | 200 µl | $455.00 |
LMX1B 编码一种 LIM 同源盒转录因子,在发育过程中指导细胞命运决定与分化程序,尤其在肢体背侧模式形成、肾小球足细胞成熟以及中脑多巴胺能神经元身份确定方面发挥重要作用。LMX1B 通过结合调控性 DNA 元件并协调依赖辅因子的转录网络,影响细胞骨架组织、细胞外基质动态以及谱系限制性基因表达等通路。LMX1B 活性异常与先天性肢体和肾脏表型相关,常在足细胞功能障碍、发育基因调控和神经元命运决定等研究背景下被重点关注。作为核内转录调控因子,LMX1B 是解析基因调控回路以及由增强子驱动的组织特异性程序控制的一个便于研究的关键节点。
LMX1B 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 LMX1B 表达。
LMX1B 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在LMX1B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性LMX1B表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 LMX1B 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。