Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
LIMK-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401296-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LIMK-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LIMK-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LIMK-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LIMK2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LIMK-2 Anticorpo (A-12): sc-365414
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LIMK-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401296-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LIMK-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401296-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **LIMK2** codifica a quinase de domínio LIM 2 (LIMK-2), uma quinase de serina/treonina que fosforila e inativa a cofilina para regular a renovação dos filamentos de actina. Por meio da sinalização de GTPases da família Rho via ROCK e PAK, a LIMK-2 coordena a dinâmica do citoesqueleto subjacente ao controle da forma celular, adesão, migração e citocinese. A atividade de **LIMK2** contribui para vias associadas à transição epitélio–mesênquima, mecanotransdução e estrutura sináptica, e a desregulação da remodelação de actina está associada a comportamento invasivo e fenótipos aberrantes de remodelação tecidual. Alterações na sinalização de **LIMK2** têm sido estudadas em contextos que incluem motilidade de células cancerosas e programas relacionados à metástase, processos neurodegenerativos envolvendo a dinâmica das espinhas dendríticas e remodelação fibrótica em que a contratilidade actina–miosina está perturbada.
LIMK-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LIMK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LIMK2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LIMK2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LIMK2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.