LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419592
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LI-cadherin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LI-cadherin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LI-cadherin Anticorpo (H-1): sc-393533
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419592 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cdh17 codifica a LI-caderina, uma molécula de adesão célula–célula dependente de cálcio da superfamília das caderinas, que contribui para a coesão e a polaridade epitelial em tecidos gastrointestinais e hepatobiliares. Por meio de adesão homofílica na superfície celular, a LI-caderina ajuda a organizar a arquitetura das junções, regula a integridade da barreira e influencia o controlo da migração e da diferenciação celulares dependente de contacto. Alterações na adesão mediada por caderinas estão associadas à remodelação epitelial, displasia e fenótipos ligados à invasão, tornando o Cdh17 um ponto de entrada útil para estudar a estabilidade das junções durante a inflamação e a progressão associada a tumores em rato. O seu padrão de expressão e a sua função de adesão também sustentam a sua utilização como um alvo ligado a marcador em estudos de identidade de linhagem epitelial e organização tecidular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LI-cadherin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cdh17 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cdh17, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cdh17 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LI-cadherin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cdh17 para a investigação da sinalização de LI-cadherin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cdh17 críticos para a função LI-cadherin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cdh17 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cdh17. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LI-cadherin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LI-cadherin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cdh17 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cdh17 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.