LHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401071
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LHX2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LHX2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LHX2 Anticorpo (LHX2A12G1): sc-81311
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401071 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
LHX2 (LIM homeobox 2) codifica um fator de transcrição com domínio LIM que regula a especificação de linhagens e a padronização de tecidos durante o desenvolvimento, com papéis de destaque na manutenção de progenitores neurais, na arealização cortical e na morfogênese do folículo piloso. Ao ligar-se a cofactores LIM e a elementos de DNA específicos de sequência, LHX2 coordena programas transcricionais ligados a decisões de destino celular, ao timing de diferenciação e a redes de sinalização responsivas a morfógenos, como o padrão dependente de WNT e SHH. A atividade desregulada de LHX2 tem sido associada a trajetórias neurodesenvolvimentais alteradas e a estados transcricionais aberrantes observados em múltiplos contextos de cancro. Como regulador nuclear, LHX2 constitui um nó útil para dissecar circuitos de regulação génica que acoplam programas de desenvolvimento a fenótipos proliferativos e de diferenciação em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LHX2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LHX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LHX2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LHX2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LHX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LHX2 para a investigação da sinalização de LHX2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LHX2 críticos para a função LHX2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LHX2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LHX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LHX2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LHX2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LHX2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LHX2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LHX2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.