LEPROT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406321
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LEPROT O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LEPROT, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LEPROT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406321 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
LEPROT (leptin receptor overlapping transcript), também conhecido como endospanina-1, é uma proteína de membrana endossomal que modula o tráfego e a abundância na superfície celular de receptores de citocinas, com efeitos marcantes sobre o LEPR e complexos de sinalização relacionados. Ao regular a internalização e a reciclagem de receptores, o LEPROT pode influenciar a saída da via de sinalização JAK/STAT e, de forma mais ampla, o controle da transdução de sinais em proximidade à membrana. Alterações na expressão de LEPROT têm sido associadas a fenótipos metabólicos por afetarem a responsividade à leptina e a homeostase energética. Seu papel na triagem de receptores também o torna relevante para estudos de sinalização associada à inflamação e de renovação (turnover) desregulada de receptores em contextos de doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LEPROT (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LEPROT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LEPROT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LEPROT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LEPROT.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LEPROT para a investigação da sinalização de LEPROT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LEPROT críticos para a função LEPROT
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LEPROT para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LEPROT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LEPROT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LEPROT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LEPROT Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LEPROT (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LEPROT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LEPROT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.